什么是 ELISA？

更新時間：2025-07-04

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ELISA 是一種對液體溶液中存在的抗原和抗體等蛋白質進行定性和定量分析的方法。將與目標抗原和抗體具有相同特異性結合能力的抗原和抗體制備在平板上，使其相互結合，最后與酶或染料發(fā)生反應，測量吸收光譜。ELISA 是酶聯免疫吸附測定 (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay) 的縮寫，是一種免疫學測定方法。ELISA 利用抗原和抗體的特異性，是一種高精度的定性和定量分析方法。

ELISA試劑盒也已市售，廣泛用于定量分析抗原和抗體。對于ELISA試劑盒而言，溫度控制通常非常重要，因此必須注意避免因冰箱存放位置不同而產生的溫差，并防止試劑盒因過冷而凍結。

根據 ELISA 方法，在進行定量分析之前可能還需要很多步驟，但最近已經開發(fā)出全自動測量設備，從而縮短了分析所需的時間。

ELISA 用途

ELISA 廣泛應用于生物技術領域。例如，它用于分析血液（例如血漿和血清）中的抗原和抗體。通過采集血液樣本并用 ELISA 測定自身抗體水平，可以診斷疾病或檢查疫苗接種后的抗體滴度。因此，ELISA 廣泛應用于醫(yī)院血液檢測的分析。近年來，越來越多的疾病通過 ELISA 進行研究。

還可以通過采集血液樣本來檢查食物中是否存在過敏原，并確定受試者是否有食物過敏。

使用 DNA 的 PCR 方法已成為檢測冠狀病毒抗原和抗體的流行方法，但 ELISA 分析試劑盒也可供出售。

ELISA 原理

ELISA 使用抗原抗體反應進行分析。

首先，將待測抗原與對該抗原具有特異性的抗體結合。為了檢測結合的抗體，還需要將標記有特定酶的抗體與抗原結合。

與抗原、抗體、酶結合的目標物質，與酶發(fā)生反應而變色的底物混合，顏色根據目標物質的量而變化，因此用吸光光度計測定吸收光譜，進行定量、定性分析。

IgG抗體常用于免疫測定方法，包括ELISA。

ELISA方法

ELISA方法有多種，市面上也有各種類型的試劑盒。我們將介紹簡單的直接法。其基本測定流程與其他方法并無太大區(qū)別。

首先，將與待測物質結合的抗體吸附到微孔板上。

使用加樣吸量器將定量的液體樣本加入微孔板中。在恒溫箱中控溫，使液體樣本中的抗原和抗體與微孔板上的抗原和抗體發(fā)生反應并結合。然后洗去多余的抗體。

結合的抗體隨后與特定酶發(fā)生反應。為了檢測酶活性，需要添加一種與酶結合后吸收光譜會發(fā)生變化的底物，然后測量并分析反應后的吸收光譜。辣根過氧化物酶 (HRP) 通常用作顯色底物。使用 HRP 時，必須注意不要使用涂有作為抑制劑的采血管，以防止污染。

最后，利用吸光度計測量并分析吸收光譜。

ELISA設備

ELISA通常需要多個步驟才能根據目標物質進行準確的分析，每個步驟都需要反復分液和清洗。此外，還需要移液器、微孔板、培養(yǎng)箱以及吸光度測量裝置等設備。

最近，一種可在一臺設備中實現移液和分光光度分析功能的裝置被開發(fā)出來。由于無需人工干預即可全自動進行測量，因此可以減少錯誤并節(jié)省時間和精力。

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